3結果分析

3.1製備所得紐莫康定B₀凍幹粉質量分析

在優化後的高压150mm製備條件(采用正相矽膠，V(二氯甲烷(工業))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1，制备中试上樣量為11.4g粗品，纽莫洗脫流量為480mL/min，康定檢測波長分別為276，研究210nm)下，高压上樣量共980g，制备中试得到4批次紐莫康定B₀凍幹粉質量共343.7g，纽莫其質量情況如表5所示。康定

由表5知：各批次凍幹粉B₀質量分數均大於95%(以凍幹粉1為例，研究其HPLC檢測如圖2所示，高压紐莫康定B₀的制备中试色譜純度為98.58%，紐莫康定C₀的纽莫色譜純度為0.04%)，可用於下遊合成。康定另外，研究各凍幹粉C₀雜質均降低至0.05%以下。周永正等以表麵修飾了極性基團的矽膠親水材料進行層析，可以將關鍵雜質C₀降至小於0.1%。相比，筆者開發的方法更能夠對紐莫康定B₀的異構體C₀進行有效去除，紐莫康定B₀是合成醋酸卡泊芬淨的起始原料，因此在產品質量上，為下遊合成提供了有效保證。

3.2製備液穩定性分析

王欣榮等發現分離過程中紐莫康定穩定性差的問題。在前期小試研究中，亦發現紐莫康定B₀製備液常溫放置不穩定，會有RRT1.36雜質峰出現。實驗以紐莫康定B₀製備收集液為研究對象，在4℃冷庫(避光)的保存條件下對穩定性進行了簡單摸索。液相檢測數據如表6所示。由表6可知：4℃避光條件下，B₀製備液放置7d時，B0的HPLC色譜純度降低了0.69%，RRT0.96峰和RRT1.14峰的HPLC色譜純度基本不變；RRT1.36峰在放置9d時檢測出來；13d時，RRT0.96峰的HPLC色譜純度降低很小，紐莫康定B₀的HPLC色譜純度減小了0.71%，RRT1.14峰的HPLC色譜純度增加了0.34%，RRT1.36峰的HPLC色譜純度增加至0.27%。因此，紐莫康定B0製備液在4℃避光的條件下7d內相對穩定。在中試生產中，紐莫康定B₀製備液需及時放入4℃冷庫中保存，需要7d內處理完畢。在實際中試研究中，有4℃避光冷庫作為輔助可以保證儲藏條件，製備液放置時間為影響其穩定性的主要因素，因此實驗中沒有考察光照、溫度對製備液穩定性的影響。

3.3總收率分析

高壓製備紐莫康定B₀的中試研究分4個亞批進行，總消耗紐莫康定B₀的粗品質量980g。為了對放大規模的商業化生產提供數據支持和借鑒，需要對總收率進行計算，實驗總收率計算式為

式中：E為凍幹粉i的質量；F為凍幹粉的B₀質量分數。

經過計算，總收率為41.32%。影響總收率的因素主要有：填料、製備方法和卡泊芬淨合成對紐莫康定B₀的粗品質量需求等。為了提高總收率，可以和生產填料的廠商尋求合作，開發新型改良正相矽膠，進而繼續優化適合其使用的色譜製備方法，優化卡泊芬淨合成後的提純工藝。亦或，統籌從發酵液至卡泊芬淨整體的提取工藝，達到一個合理的平衡點，以降低其對紐莫康定B₀的粗品質量要求，進而可以提高紐莫康定B0高壓製備的收率。

另外，為了提高生產的總收率和降低成本，也可以將高壓製備過程中產生的HPLC色譜純度低於95%的B₀製備液進行回收利用。具體方法：將低濃度製備液經過收集、濃縮和幹燥後，得到回收凍幹粉(HPLC檢測如圖3所示，紐莫康定B₀的色譜純度為84.30%，紐莫康定C₀的色譜純度為0.65%)，再次進行製備回收套用。

4結論

以二氯甲烷、甲醇和水體係製備紐莫康定B₀，國內外未見具體報道。筆者以單因素實驗的方法確定了150mm高壓製備紐莫康定B₀的條件：采用正相矽膠，V(二氯甲烷(工業))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1，上樣量為11.4g粗品，洗脫流量為480mL/min，檢測波長分別為276，210nm。相比氯仿、甲醇和水體係，該製備工藝毒性小，更綠色環保。以優化後條件，可以得到質量分數95%以上的B₀幹粉，能有效將B₀異構體C₀降至0.05%以下，為下遊合成卡泊芬淨提供了更好的保證。通過對紐莫康定B₀製備液穩定性研究，製備液需及時放入4℃冷庫中保存，需要7d內處理完畢，為進一步放大生產提供了數據支持。製備工藝生產周期短、成本低，且純度高。

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